槐糖脂生产、应用研究可行性分析调查报告

　槐糖脂生产、应用研究 项目可行性研究报告 槐糖脂是一种重要的生物表面活性剂，其分子由两部分组成，亲水性部分是槐糖(-1,2-葡萄糖苷)，疏水性部分是饱和或不饱和的十六或十八个碳原子的-(或-1)羟基脂肪酸，主要分为内酯型和酸型两大类。

　对于槐糖脂的研究始于二十世纪五、六十年代，主要通过微生物发酵获得。与化学合成的表面活性剂相比，具有表面性能优良、易生物降解、环境友好等许多优点，并且由于合成槐糖脂的原料主要是一些价格低廉的油脂和糖类，其本身无毒、无嗅、无味，对人体皮肤无刺激作用，因而在石油、冶金、化妆品、食品、医药等许多领域，显示出很好的市场前景。降低表面张力、稳定乳化液和增加发泡。近年来在医药领域，槐糖脂也被用于癌症、帕金森氏病、老年性痴呆症、牛皮癣、艾滋病等的治疗，还可用作抗病毒药物（抗 HIV 等）和抗菌剂。

　大量市场信息和国家进出口资料表明，我国每年从国外大量进口癌症辅助治疗药物，来满足国内癌症患者的需要。其进口药价昂贵，随着人们生活水平的提高，医疗费用承受能力的提高，在治疗肿瘤及辅助用药上，利用槐糖脂生物表面活性剂和具有抗肿瘤活性的特点，制备微球制剂导向药物，从而能为疗效更好，毒性更低，靶向性更好的抗肿瘤药物开辟一条新途径。目前肿瘤已成为导致我国人口死亡的重要病症之一，据卫生部统计，近年来我国新增肿瘤

　患者 200 万人，死亡 130 万人，目前全国肿瘤患者约为 450 万人左右。如此众多的肿瘤患者形成了一个庞大的抗肿瘤药物市场。另据有关部门对北京上海等14个大城市200多家医院抗肿瘤用药金额统计，1999年、2000 年、2001 年上述区域医院抗肿瘤用药金额在持续上升，上升幅度为 20%以上。近几年肿瘤用药销售额所占医药百分比逐年上升，从 1999 年的 41%上升至 2001 年的 50%。在药品价格不断调整的情况下，销售额比例依然上升，表明市场容量仍处在增长期。因此尽快筹建该项目是抢占市场获取前期高额利润的当务之急。

　1 、申请企业情况：

　1.1 企业基本情况: 企业名称: 山东健民药业有限公司 企业地址：山东省菏泽市中华西路 367 号 注册时间：2003 年 7 月 14 日 注册资金：2200 万元 法人代表：晁岱勇 企业类型：有限责任公司 联系电话：0530-5299979

　15305308087 山东健民药业有限公司成立于 1971 年，前身为山东菏泽中药厂，是经国家批准成立的技术含量高，也是我市最早而且唯一的中成药生产企业。厂区占地 100 亩，建筑面积 28000 平方米，生产车间面积12000 平方米，仓储面积 2400 平方米，质检中心 330 平方米，行政办公面积 1100 平方米，绿化面积 5000 平方米。现有片剂、颗粒剂、

　丸剂、散剂、口服液、煎膏剂、糖浆剂六大剂型 70 余种不同规格的产品。现在，公司的片剂、颗粒剂、口服液、煎膏剂、散剂等七条现代化生产线，于 2004 年一次性全部通过 GMP 认证；主要产品有新复方大青叶片、咽炎片、婴儿健脾散等 41 个品种，并在此基础上开发了中药饮片项目，现具备片剂 10 亿片，颗粒剂 4000 万袋，口服液1000 万支的年生产能力。

　几年来公司不断加大固定资产投资。截止目前，固定资产累计达3264 万元，流动资产累计达 3871 万元，资产总额达 7801 万元。公司在原有 200 余台套各类生产设备的基础上斥巨资引进处于国内及国际领先水平的设备 60 台套，极大满足公司生产量日益扩大的需要。同时公司还对药品检验中心进行全面升级改造，增添了一批先进的检测仪器，极大地提高了产品检测的精度，有效地保证了产品质量的稳定性。

　为使山东健民药业有限公司快步进入集团化发展之路，2006 年公司在经营方向及策略上作出重大举措，斥资 2.1 亿元组建占地 230亩集生物制药、功能性食品、口服抗生素、大输液为主的山东健民医药工业园，为公司走集团化、多元式发展的道路夯实了基础。项目建成投产后，可实现销售收入 10 亿元，利税 6000 万元。健民生物制药的成立，填补了菏泽地区无生物制药的历史空白，将成为菏泽医药企业的一个亮点。山东健民药业有限公司已发展成为一个集产品研发、生产、销售、批发为一体的综合型企业集团。必将产生良好的社会效益和巨大的经济效益。

　 公司连年被菏泽市、牡丹区两级评为“重点保护企业”、“精神文明先进单位”、“重和同守信用企业”、2006 年被中国人民银行菏泽支行评为“客户信用 AA 级企业”，“晁氏”商标被山东省工商行政管理局认定为“山东省著名商标”。

　1.2 企业及研发能力：

　1.2.1 企业人员状况; 公司现有员工 375 人，均高中以上文化程度。其中博士学位 1 人，大专以上学历 169 人，中专（高中）学历 205 人；专业技术人员 217人，中、高级技术人员 50 人，专业技术人员占公司员工总数的 57%。

　1.2.2 研发能力: 1.2.2.1 企业拥有一支高素质的研发队伍: 公司设有产品研发部，直属总经理领导，由总工程师负责项目的具体实施，专门从事技术创新和新产品的开发工作。研发部配有 5 名专职技术人员，其中 1 名研究生，3 名大学本科生，1 名专科生；高级工程师 1 名，工程师 2 名，中药师 2 名。他们具有丰富的实践经验和理论知识，为公司产品的工艺改造及新产品的开发提供了强有力的技术支撑。

　1.2.2.2 企业拥有丰实的技术储备: 企业根据中药现代化不断发展的新形势，密切关注新技术和新工艺，及时对新技术和新工艺进行前瞻性研究，已经掌握了一步制粒、口服液的大孔树脂吸附澄清技术及酶法生物提取技术等先进的技术手段，并对其进行了深入的系统研究，为现有的产品提高质量、降低

　生产成本做好了充分的技术储备。

　公司始终坚持与大专院校、科研院所相结合，加大技术人员的知识更新力度，采取“走出去，请进来”的办法，对员工进行专业知识和管理知识的培训，以提高员工的业务技能和操作水平，提升企业的核心竞争力。公司先后与山东省医学科学院、山东省中医药大学、山东大学生命科学院签订了新产品联合开发协议，已成功的开发了四季感冒片、妇科止带颗粒、丹莪妇康颗粒，在研产品有槐糖脂生产、应用及生物活性研究。

　1.2.2.3 企业高度重视技术研发投入: 公司高度重视技术研究与开发的资金投入，每年的科研经费均在销售收入的 3%以上，2006 年达到了 6%，投入额度已达到 200 万元，并保证了专款专用，为企业的技术研究与产品开发提供了强有力的资金支持。

　1.2.2.4 建立了先进的技术研发中心: 自公司成立技术研发中心以来，先后购置了较为先进的多功能提取机组，全自动压片机、数控高效包衣机、大孔树脂分离柱及超声提取罐及相关的配套设施，累计投入资金达 300 万元，为企业的技术研究与产品开发提供了强有力的技术平台。

　3 1.3 企业资金管理能力

　：

　本公司拥有一支优秀的财务管理队伍，具有较强的资金运做和管理能力。企业内部的资金管理，尤其是对应收、应付帐款的管理方面，制订了一套完整可行的财务管理制度。（1）制定合理的信用制度。尽

　量缩短企业的平均收款期、降低企业坏帐风险。（2）实行了“应收帐款”回收责任制，目标到人，考核到人。（3）建立了“应收帐款”的内部报告制度和风险管理体系。（4）做好了“应收帐款”的定期对帐和债权确认工作，定期让债务方确认“应收帐款”金额。（5）制订了合理的应付账款付款计划，主要根据公司的原材料及设备工程项目等付款需求，对各应付账款单位在每月进行分批付款。

　1.4 企业财务经济状况：

　企业注册资金 2200 万元，总资产已达到 7801 万元，其中固定资产 3264 万元，流动资产 3871 万元,无形及递延资产 620 万元,企业负债率 16%；截止目前，今年已完成销售收入 9063 万元，实现利税 1523万元。

　2、 、 项目的技术可行性和成熟性分析：

　2.1 项目研究的技术路线：

　2.1.1 槐糖脂发酵菌株的工程代谢育种: 从 gene bank 中获得葡萄糖基转移酶 I 和 II 的基因序列用于引物设计，利用 PCR 克隆两种酶的全基因，连接到载体质粒中，构建目的基因高效表达质粒，将该质粒转入目的菌株拟威克酵母变种中，构建葡萄糖基转移酶 I 和 II 过量表达的工程菌。

　2.1.2 素 研究促进细胞色素 P450 酶活和的因素 强化，并强化脂肪酸的 - 和 - 氧化，抑制 - 氧化: 与细胞色素 P450 酶活的大小和-和-氧化途径有关的因素都可能影响槐糖脂的生产。可以通过研究 H 2 O 2 旁路途径等达到提高槐糖

　脂产量的目的。

　2.1.3 槐糖脂催化工艺的优化: 利用经过代谢工程育种改造后的拟威克酵母变种槐糖脂产生菌进行发酵工艺的优化，大规模发酵生产槐糖脂。建立酶催化体系，研究催化工艺，进行催化过程优化。

　2.1.4 不同脂肪酸组分的槐糖的制备: 在培养基中添加脂肪酸链长不同、饱和度不同、含量不同的多种植物油脂（玉米油、葵花籽油、花生油），制备主产物中脂肪酸组分不同的槐糖脂，研究其表面活性和生物活性。用表面张力仪研究其表面活性，通过绘制常见病原菌及条件病原菌的抑菌曲线研究其抑菌活性。

　2.1.5 槐糖脂的中试研究及应用: : 研究槐糖脂扩大生产到 200L 的发酵罐中的催化工艺及催化过程优化，简化下游提取分离过程，并初步进行其在食品工业、日化工业及农业等领域中的应用研究。

　2.3 项目技术创新性: .3.1 本课题组从 2002 年开始了槐糖脂产生菌的筛选，得到两株具有自主知识产权的槐糖脂产生菌，其中一株拟威克酵母变种所产槐糖脂的产量可以稳定在 100g/L 的水平。

　2.3.2 目前关于槐糖脂的研究主要集中在槐糖脂的发酵条件的优化，结构修饰和关于多种槐糖脂衍生物的生物活性的研究。关于槐糖脂合成的代谢途径的研究，尚未见到研究报道。槐糖脂的合成途径如下图所示。

　图 图 以葡萄糖和脂肪酸作为混合碳源时合成槐糖脂的代谢途径 从上面的槐糖脂合成途径可以看出，当以葡萄糖和长链脂肪酸作为混合碳源时，槐糖脂合成途径中的关键酶为葡萄糖基转移酶 I 和 II，通过构建这两种酶过量表达的目的菌，能够达到大幅度提高槐糖脂产量的目的。

　在槐糖脂的分子构成中酸组分部分是或-1 脂肪酸，通过促进细胞色素 P450 的酶活，可以促进-脂肪酸的合成，从而可以改变代谢途径中的代谢流，能够促进槐糖脂的合成。

　本课题主要通过构建拟威克酵母葡萄糖转糖基酶 I 和 II 过量表达的目的菌，同时通过强化脂肪酸的-和-氧化，抑制-氧化，同时研究影响细胞色素 P450 酶活的因素，提高细胞色素 P450 的酶活用代谢工程手段调控槐糖脂的代谢过程，达到大幅度提高其产量的目的。

　2.3.3 关于内酯型槐糖脂在诱导肿瘤细胞凋亡方面的研究，到目前为止，除本实验室已发表的论文以外，国内外尚未见文献报道。与槐糖脂抗肿瘤活性有关的工作，我们已经申请两项专利—“一株产槐糖脂的拟威克酵母变种及其应用”（专利受理号为 200610042190.9）

　“一种拟威克酵母变种抗肿瘤活性槐糖脂粗提物的制备方法”（专利受理号为 200610042181.x）。槐糖脂其他方面的应用研究工作也在进行中，如在抑制白色念珠菌及革兰氏阳性菌方面的研究国内外尚未见研究报道，关于此方面研究，申请人已经申请专利一项—“槐糖脂在制备抗生素药物中的应用”（专利受理号为 200710013200.0）。

　2.3.4 本项目合成槐糖脂的原料主要是一些价格低廉的油脂和糖类，从而保证了产品的价格优势，且其本身无毒、无嗅、无味，对人体皮肤无刺激作用，符合“绿色环保”消费这一当今人们追求的主题。

　本项目完成后，作为专利和有知识产权的创新点有：获得新菌种和基因，经传统及现代生物技术改造，提高酶表达量，建立新发酵工艺并使大规模工业生产的成本大幅度降低，可以申请新的专利和形成自己的知识产权。

　2.4 项目技术成熟性和可靠性：

　 2.4.1本实验室筛选得到的有自主知识产权的拟威克酵母变种的发酵产量可稳定达到100g/L；目前研究槐糖脂已扩大生产到200L的发酵罐中的催化工艺及催化过程优化，简化下游提取分离过程，并初步进行其在医药、食品工业、日化工业及农业等领域中的应用研究槐糖脂作为目前研究得最多的，在各个领域都能够广泛应用的一种表面活

　性剂具有很好的市场前景。这些都为本项目的研究提供了可靠的实验基础。

　2.4.2 本课题组依托的是微生物技术国家重点实验室。本项目的实验室理论研究部分安排在本实验室完成。本实验室具有开展现代微生物学、生物化学和分子生物学研究的人才和实验条件。拥有酶学必需的操作室，无菌室、CO 2 培养箱。拥有称量、恒温、干燥、细胞细菌培养、灭菌、离心、冷冻、搅拌、振荡等基本设备，其中包括二台超净工作台、三台台式高速离心机、日立高速冷冻离心机、三台超低温冰柜、冰箱、恒温冷冻摇床、可见紫外检测仪、盖革计数器、Olympus 荧光显微镜、倒置显微镜、液氮罐等, 还配有联网微机、刻录机、扫描仪及一些生物化学和生物信息学分析所需的软件包, 如用于蛋白、DNA 序列分析用的软件包 DNASIS 等，另外还有一些统计学分析软件。HPLC-MS、GC-MS、高效毛细管电泳、HPLC 运转正常。而且山东大学实验中心、化学与化工学院可提供核磁、质谱、红外光谱、紫外光谱、扫描电镜、透射电镜等分析仪器的使用，山东大学医学院和药学院可提供流式细胞仪等仪器的使用。

　2.4.3 为了保证槐糖脂项目的顺利实施，公司于 2007 年 3 月投资200 万元建立了槐糖脂中试生产车间，在人力方面也给与了最大程度的倾斜。

　3 、项目产品市场调查竞争力预测：

　3.1 目前国内外技术、产品发展现状: 国外目前槐糖脂的生产菌种局限在美国典型菌种保藏中心的Candida bombicola ， Candida apicola...